母豬胚胎存活率受日糧營養(yǎng)水平的影響，部分研究發(fā)現(xiàn)高營養(yǎng)水平降低了胚胎成活率，也有相反研究結果報道。胚胎成活率的降低對生產母豬產仔數(shù)來說是不利的，而高產母豬并不受影響。相反高胚胎成活率增加了胎兒發(fā)育遲緩、平均初生重下降的風險。而且，胚胎的存活率越高，胚胎發(fā)育的變異系數(shù)越大。
因為子宮著床階段胚胎死亡率的波動有利于胚胎變異系數(shù)的降低(Pope等,1986)。因此，在著床前高產母豬胚胎存活率下降的同時，降低了胚胎早期的變異系數(shù)和子宮擁擠，有利于改善仔豬出生性能。本實驗旨在研究妊娠第1周高營養(yǎng)水平飼糧對高產母豬胚胎存活率和均勻度的影響。母豬受精后營養(yǎng)和孕酮水平對胚胎的影響已有報道(Den Hartog和van Kempen,1980;Dyck and Strain,1983；Ashworth,1991;Jindal等,1996)。盡管高排卵率對經產老母豬來說容易造成子宮擁擠，但排卵數(shù)高達20個甚至以上時，也會限制高產母豬胎盤發(fā)育，造成子宮擁擠(Almeida等,2000)。
1、材料與方法
1.1實驗動物
30頭在產仔數(shù)方面經過10代以上品種選育的大白高產母豬(INRA herdNouzilly,France)，比一般大白母豬至少多產3頭仔豬，黃體數(shù)多4個以上。每6頭一圈，自然光照，漏縫地板。母豬第1次或第2次發(fā)情后（連續(xù)18 d）口服烯丙孕素，然后每天2次趕公豬檢查母豬的發(fā)情跡象(早上9點和下午4點各1次)。發(fā)情的第1天定為第0天，人工授精2次，每次每圈使用同一頭皮特蘭種豬新鮮稀釋精液。早上第1次出現(xiàn)站立不動發(fā)情現(xiàn)象，8 h后進行第1次人工授精，24 h后進行第2次。當?shù)?次發(fā)情是在下午檢測到，16h后進行第1次人工授精，第2次8 h后。授精時發(fā)情母豬的平均日齡為(227±1)d，活重(133±2)kg。
1.2飼養(yǎng)管理
第1次人工授精后，母豬標準日采食量2 kg，預飼1 d(營養(yǎng)水平：12.5MJ/kg,13.5%CP和0.5%Lys)。然后隨機分成2組，一組為高營養(yǎng)水平組，日采食量4 kg，升為原來的2倍(n=15)；另一組為對照組，采食量維持不變(n=15)，持續(xù)7 d。個別收集剩料，最后集中一起脫水稱重，計算平均日采食量。7 d后，所有母豬重新回到日采食量2 kg水平。
1.3屠宰測定
妊娠的第26，27和28天在當?shù)赝涝讏鲞M行屠宰，因為這一時期母豬剛剛進入著床期(Johnson等,2009)，子宮方面還不是胚胎存活率的限制因素(Fenton等,1970)。因此，只有營養(yǎng)因素(排除了潛在的子宮擁擠因素)對高產母豬排卵率有影響。屠宰后立即收集生殖道，稱重雙側卵巢，黃體計數(shù)稱重；分離子宮角和闊韌帶，測量子宮長度；從一側卵巢縱切，收集胚胎。每個胚泡由胚膜包著胚液，精心與子宮內膜分離，然后從胚泡中分離出胚胎，稱重，用卡尺測量胚胎長度。最后，計數(shù)活胚胎數(shù)，死胚胎數(shù)(尿囊和羊膜中有黑色液體)，以及被吸收胚胎數(shù)（胚胎和液體消失）。
1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
胚胎存活率的計數(shù)標準：活胚胎數(shù)/黃體數(shù)；
著床后胚胎存活率：活胚胎數(shù)/總胚胎數(shù)；
每窩胚胎重量和長度的平均值和變異系數(shù)；
子宮密度：活胚胎數(shù)/子宮角長度(m)；
每個活胚胎數(shù)或黃體可利用空間：子宮角長度(cm)/活胚胎數(shù)。
妊娠27 d之前（不管是著床之前，期間和之后）的胚胎存活率與受精率有關，而著床后的胚胎存活率專指附著胎盤的胚胎存活率（大約18－27 d之間）。妊娠27 d基本可以確定宮內發(fā)育遲緩(子宮內生長阻滯)，統(tǒng)計弱胚胎數(shù)，即活胚胎重低于每窩平均值減去兩個標準差的重量。全部數(shù)據(jù)采用SAS(SAS Inst.Inc.,Cary,NC)進行方差分析，模型包括組內和組間效應，某些參數(shù)引入黃體數(shù)或妊娠年齡的分析變項，P<0.05差異顯著，結果顯示為平均值±標準誤。
2、結果分析
2.1飼糧營養(yǎng)水平對胚胎存活率和發(fā)育的影響
高營養(yǎng)水平組2頭母豬出現(xiàn)剩料現(xiàn)象，7 d的平均日采食量分別為3.8 kg和3.9 kg，因此屠宰了28頭母豬(高營養(yǎng)水平組13頭，對照組15頭)。從表1可以看出，兩組的母豬妊娠率沒有差異性（P>0.1），妊娠27 d兩組母豬繁殖性狀也沒差異性。平均排卵數(shù)(21.0±0.5)個，波動范圍14～27；胚胎存活率85.4%(55%～100%)；著床后的胚胎存活率96.7%(77%～100%)；平均子宮密度（單位長度子宮角的活胚胎數(shù)）為（4.7±1.1）個/m；活胚胎可利用空間為21.3 cm/個，黃體可利用空間18.6 cm/個。結果表明，高產母豬妊娠第1周飼糧營養(yǎng)水平高低對以上指標沒有影響，差異不顯著。
從表2可以看出，胚胎的平均重量為(0.88±0.17)g，平均長度為(20.6±1.1)mm；每窩胚胎重量和長度的平均變異系數(shù)分別為11%和5%；兩組間的這些指標都沒有差異性。幾乎一半的母豬(高營養(yǎng)水平組：6/13，對照組：6/15，P>0.10)都會出現(xiàn)1個弱胚胎。是否出現(xiàn)弱胚胎的母豬無論是在排卵率，活胚胎數(shù)還是子宮密度，都沒有差異性(P>0.10)。
2.2繁殖參數(shù)之間的關系
對2個處理組間的相互關系進行了統(tǒng)計分析，發(fā)現(xiàn)營養(yǎng)水平對胚胎性狀沒有顯著影響，從表3可以看出，總體或著床后的胚胎存活率與排卵率或子宮長度沒有顯著的相關性，與母豬不同的年齡階段體重(斷奶時，150日齡或烯丙孕素治療結束時，表3數(shù)據(jù)未顯示)和其他胚胎性狀平均值都沒有顯著的相關性。妊娠27 d活胚胎數(shù)與排卵率正相關，與胚胎重量和大小無關。平均胚胎重與妊娠時間顯著相關(r=0.67,P<0.001)，平均胚胎長度與子宮長度負相關，與子宮密度正相關。胚胎重量或長度的變異系數(shù)與排卵率，總胚胎數(shù)，子宮密度和胚胎存活率不存在顯著相關性。
3、討論
人工授精后第1周飼糧營養(yǎng)水平對高產母豬妊娠30 d胚胎存活率沒有影響。一般交配后高營養(yǎng)水平對胚胎存活率的不利影響可能由于循環(huán)中孕激素濃度的降低所導致(DenHartog和v a n K e m p e n,1 9 8 0;D y c k和Strain,1983;Jindal等,1996;De等,2009)。
首先，營養(yǎng)水平導致肝血循環(huán)速度發(fā)生變化，從而改變豬代謝過程中孕酮的清除速度(Prime和Symonds,1993;Mille等，1999)，交配后補充孕激素可以提高早期胚胎存活率(Ashworth,1991;Jindal等,1997)。和低營養(yǎng)水平飼糧比較，妊娠早期高營養(yǎng)水平降低了孕酮濃度，母豬胚胎存活率隨之下降(Jindal等,1997;Virolainen等,2005)。然而，也有報導稱交配后飼糧營養(yǎng)水平影響了循環(huán)中孕酮水平，胚胎存活率不受影響(Dyck和Kennedy,1995;Ashworth等,1995)。本實驗妊娠早期未進行采血以避免產生過多的應激，因此，飼糧營養(yǎng)水平對高產母豬孕酮的影響仍是未知數(shù)。就胚胎重量和長度來說，飼糧營養(yǎng)水平(采食量和能量水平)對妊娠早期(9～12 d)母豬胚胎生長及胚胎大小和存活率變異系數(shù)沒有影響(Ashworth等,1999;Cassar等,1994)。據(jù)推測高營養(yǎng)水平通過影響母豬妊娠早期的胚胎存活率，可能進一步影響胚胎發(fā)育的變異系數(shù)。當營養(yǎng)水平不影響高產母豬胚胎存活率時，胚胎發(fā)育的變異系數(shù)差異性也體現(xiàn)不出來。
不考慮營養(yǎng)因素，妊娠27 d胚胎存活率與排卵率和子宮角長度也無關，這與以往的研究結果是一致的。妊娠25～30 d母豬子宮容量大小并不是產仔數(shù)的限制因素(Fento等,1970)；而排卵超過20～22個例外(Blasco等,1996)。Patterson等(2008)指出，對經產母豬來說，排卵率和妊娠27 d胚胎存活率呈負相關。一方面，由于這些母豬平均排卵率高(>22)，接近1/3的母豬排卵超過25個；另一方面，Chen和Dziuk(1993)研究發(fā)現(xiàn)當子宮可利用空間小于25 cm/CL時，胚胎存活率則受子宮容量大小的影響。雖然本實驗高產母豬也出現(xiàn)早期子宮擁擠現(xiàn)象，但胚胎存活率與子宮可利用空間沒有相關性。
考慮到本實驗都是青年高產母豬，其排卵率高，胚胎存活率能達到85%非常不錯了。經產2胎或3胎的母豬平均排卵數(shù)為21個，平均胚胎存活率為75%(Patterson等,2008)。?strup等(2009)調查顯示LR×LW高產母豬平均胚胎存活率可達到82%。本實驗在妊娠27d后很少發(fā)現(xiàn)死胚胎，而子宮著床定植的過程只需要12～25 d(Johnson等,2009)，說明妊娠的第1個月大多數(shù)胚胎死亡率在著床之前或開始之時發(fā)生。由于高的早期胚胎存活率，第27天屠宰時平均活胚胎數(shù)達17.5個；但著床穩(wěn)定完成一般35 d(Chen和Dziuk,1993;Vonnahme,2002)或45～50 d(Foxcroft等,2006)完成，所以并不代表第27天所有的活胚胎數(shù)都能存活下來。
妊娠27 d或少于35 d，總胚胎數(shù)與胚胎重量和長度無關(Knight等,1977；Patterson等,2008)，活胚胎數(shù)與胎盤重量成反比關系，意味著子宮擁擠對早期胚盤發(fā)育影響高于胚胎發(fā)育。高產母豬妊娠35 d后出現(xiàn)子宮擁擠(高產母豬妊娠27 d，窩內胚胎重量變異系數(shù)和胚胎存活率無關。盡管著床時胚胎死亡率的波動可以降低弱胎的機率，但對定植后胚胎變異系數(shù)影響不確定。此外，實驗過程中沒有發(fā)現(xiàn)與胚胎低死亡率有關因素，因為胚胎存活率和胚胎異質性的關系需要更大規(guī)模母豬群和可能需要觀察妊娠后期階段。Quesnel等(2008)研究發(fā)現(xiàn)妊娠27 d胚胎重量的變異系數(shù)為11%，出生時為21%，說明在胚胎發(fā)育的過程中胚胎異質性提高了1倍。最后，研究結果還顯示妊娠27 d就可以檢測出弱胚胎，與vander Lende等(1990)和Ferguson等(2006)研究結果一致。弱胚胎與排卵率和胚胎可用空間之間并沒有關系，而早期發(fā)育遲緩更可能是由于卵母細胞質量受損，而不是妊娠早期子宮擁擠。
4、結論
妊娠早期飼糧高營養(yǎng)水平沒有降低高產母豬27d胚胎成活率，對胚胎大小和變異系數(shù)也不存在利弊性。不考慮營養(yǎng)因素，如果高產母豬出現(xiàn)高的胚胎存活率可能導致胚胎擁擠，對胚盤和胚胎后期階段的發(fā)育帶來不利影響。
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部副部長牛盾致辭2 7_140919140845.JPG)
